Título: Aislamiento y caracterización de células madre tumorales en cáncer de pulmón no microcítico

Autor: Juan Diego de Maya

Director: Rosa Farràs Rivera

Tutor: Sergi Maicas Prieto

Abstract: 

El carcinoma pulmonar es la causa principal de muerte relacionada con el cáncer en todo el mundo El cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) representa un alto porcentaje del total de todos los tumores de pulmón. Hoy en día en la clínica existen fármacos y estrategias terapéuticas dirigidas para tratar a los pacientes según el subtipo o mutaciones conductoras del tumor.Estas terapias dirigidas han sido posibles gracias al mayor conocimiento del genoma, así como de mejoras en las técnicas de identificación de las mutaciones génicas. La supervivencia del cáncer de pulmón sigue siendo baja ya que la mayoría de los pacientes no pueden beneficiarse de una terapia dirigida y el fracaso en los tratamientos de quimioterapia son frecuentes. Uno de los factores que puede contribuir a este fracaso es la existencia de una subpoblación de células madre tumorales (CMT) en el tumor. Las CMT se creen en gran parte responsables de la agresividad y progresión del cáncer. Esta tesis se centra en la identificación y caracterización de subpoblaciones de CMT en el CPNM. Hemos usado una colección de líneas celulares establecidas como son las A549, H1395, H1650, H1993 y PC9, pero también líneas celulares derivadas de tumores de pacientes (LDP) con CPNM establecidas en nuestro laboratorio a partir de la disgregación de tumores primarios de pacientes. Hemos puesto a punto una metodología para la formación de tumoroesferas enriquecidas en poblaciones de CMT. Ensayos de inyección de células en ratones inmunocomprometidos permitieron la evaluación de la capacidad iniciadora de tumores (CIT) de las tumoroesferas, confirmando su característica de CMT. Se han realizado ensayos de citometría multiparamétrica de poblaciones de tumoroesferas comparados con cultivos tradicionales en monocapa que permiten la identificación de potenciales marcadores de CMT. Mediante citometría de flujo ha analizado marcadores de CMT en células provenientes de la disgregación de tumores primarios de CPNM recién resecados. Estos tumores primarios muestran una enorme variabilidad, pero a pesar de esta, algunos de los potenciales marcadores de CMT se han relacionado con variables clínico-patológicas, aunque estos resultados deberán ser validados en cohortes de pacientes mayores. Los resultados obtenidos identifican posibles marcadores de CMT en CPNM y sus vías de señalización.